隨著科研人員對微觀世界的探索日益增多,對于微觀世界也更加深入,那對于顯微鏡的分辨率要求也就更高了。從細胞結構到亞細胞結構,從微米級到亞微米級乃至于納米級。這也使得常規的光學顯微鏡無法適應這一要求。這時候激光共聚焦顯微鏡就應運而生。
那為什么激光共聚焦顯微鏡能實現更高的分辨率呢?要明白這一問題,首先我們要知道光學顯微鏡成像的原理,簡而言之就是利用了光的折射,用不同的透鏡組合去折射樣品反射或者透過樣品的光,從而實現像的放大。那在這個過程中,分辨率d其實就有了一個理論放大極限。由于可見光波長范圍λ的限制(390nm~700nm),即使使用波長最短的紫光,在一般的數值孔徑N.A.~1的約束下,
分辨率d很難達到200nm以下。
那這個時候,用波長更長的激光作為光源是不是就能解決問題呢?顯然沒有這么容易,激光是屬于人眼無法識別的光,那這個時候就需要將激光信號通過激光接收器轉化為電信號,再二次處理將電信號轉化為可見光的光信號,成像到顯示器上,這也就產生了成像質量的區別。所以說評價一款顯微鏡是否優秀,除了分辨率,成像質量也同樣重要。
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